酶聯(lián)免疫試劑盒吸附試驗(yàn)

一  酶聯(lián)免疫試劑盒用于標(biāo)記的酶 用于標(biāo)記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室溫下穩(wěn)定；反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn)；能商品化。目前應(yīng)用較多的有辣根過(guò)氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應(yīng)用zui廣。
1.辣根過(guò)氧化物酶（HRP） 過(guò)氧化物酶廣泛分布于植物中，辣根中含量zui高，從辣根中提取的稱(chēng)辣根過(guò)氧化物酶（HRP），是由無(wú)色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白（含糖量18%），分子量約40 000，約由300個(gè)氨基酸組成，等電點(diǎn)為pH 3-9，催化反應(yīng)的zui適pH值因供氫體不同而稍有差異，一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的硫酸銨溶液。酶蛋白和輔基的zui大吸收光譜分別為275nm和403nm。
酶的純度以RZ表示：RZ=OD403/OD275
純酶的RZ多在3.0以上，zui高為3.4。RZ在0.6以下的酶制品為粗酶，非酶蛋白約占 75%，不能用于標(biāo)記。RZ在2.5以上者方可用于標(biāo)記。HRP的作用底物為過(guò)氧化氫，催化反應(yīng)時(shí)的供氫體有幾種：（1）鄰苯二胺（OPD），產(chǎn)物為橙色，可溶性，敏感性高，zui大吸收值在490nm，可用肉眼觀察判別，容易被濃硫酸終止反應(yīng)，顏色可在數(shù)小時(shí)內(nèi)不改變,是目前國(guó)內(nèi)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)中zui常用的一種；（2）聯(lián)大茴香胺（OD）,產(chǎn)物為橘黃色，zui大吸收值在400nm，顏色較穩(wěn)定；（3）5－氨基水楊酸（5－AS）：產(chǎn)物為深棕色，zui大吸收值在450nm，部分溶解，敏感性較差；（4）鄰聯(lián)甲苯胺（OT）產(chǎn)物為藍(lán)色，zui大吸收值在630nm，部分溶解，不穩(wěn)定，不耐酸，但反應(yīng)快，顏色明顯。
2.堿性磷酸酶 系從小牛腸粘膜和大腸桿菌中提取，酶聯(lián)免疫試劑盒由多個(gè)同功酶組成。它們的底物種類(lèi)很多，常用者為硝基苯磷酸鹽，廉價(jià)無(wú)毒性。酶解產(chǎn)物呈黃色，可溶，zui大吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反應(yīng)系統(tǒng)中，37℃1分鐘水解1μg磷酸苯二鈉為一個(gè)單位。

二  基本原理 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，此種結(jié)合不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此，可通過(guò)底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過(guò)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀進(jìn)行定量測(cè)定，這樣就將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來(lái)，使ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)方法成為一種既特異又敏感的檢測(cè)方法。

人水痘帶狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱(chēng)：    Human Varicella zoster virus IgM，VZV IgM ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱(chēng)：    Human Varicella zoster virus IgG，VZV-IgG ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human Legionella antibody IgA，LP Ab-IgA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM )ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human Legionella antibody IgM，LP Ab-IgM ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱(chēng)：    Human Legionella antibody IgG，LP Ab-IgG ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人腮腺炎病毒IgM ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱(chēng)：    Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人腮腺炎病毒IgG ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human paramyxovirus parotitis IgG ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human epstein-barr virus IgM，EBv IgM ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人EB病毒IgA(EBv IgA)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱(chēng)：    Human epstein-barr virus IgA，EBv IgA ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人EB病毒IgG(EBv IgG)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱(chēng)：    Human epstein-barr virus IgG，EBv IgG ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human dengue fever antibody，DF ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人流感病毒抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human Influenza viruses IgG，F(xiàn)LU ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱(chēng)：    Human Adenovirus IgM，ADV-IgM ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱(chēng)：    Human Adenovirus IgG，ADV-IgG ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T
人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒    *    英文名稱(chēng)：    Human Rotavirus，RV IgM ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T