在大鼠Elisa試劑盒操作過程中總是會呈現(xiàn)或大或小的問題，比如說花板、假陽性、全顯色、信號值比空白還低等等。今日上海一研為咱們帶來了一些實驗經(jīng)驗總結(jié)，教您這樣操作ELISA試劑盒實驗不會失利。
1.有的包被原可能不是蛋白，關(guān)于和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)咱們要事前對其改造再加以包被，我把辦法簡明的列出如下：
2.親和素：先親和素先包被載體，參加化的DNA，這種包被辦法均勻、結(jié)實，已擴展應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
3.小分子必需依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才干固定在固相載體上。包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這到你做出的抗體可不能夠 被其辨認，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴格正告我必定要在冰浴下緩慢消融就是這個道理。
4.脂類物質(zhì)：可將其在有機溶劑中溶解后參加Elisa板孔中，開蓋置冰箱過夜或涼風吹干，待酒精蒸發(fā)后，讓脂質(zhì)天然干固在固相外表。
5.在洗板時會有必定誤差，人為因素很大(當然有條件的用洗板機在外)，洗的不*或串了孔，對如斯敏捷的ELISA體系但是不小的影響。由于 聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，為到達別離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖，鏟除殘留在板孔中游離的物質(zhì)，以及非特異性地吸附的干 擾物質(zhì)，在洗刷時又應把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來。洗刷板：能夠說在ELISA操作中，洗刷是zui首要的紐帶技能。