公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63798 |
細(xì)胞名稱(chēng) 猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性猞猁的皮膚組織。2000年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
風(fēng)疹病檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人鱗癌細(xì)胞(高分化);HCC-94[HCC941122;HCC94]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣rubella virus
粉塵螨特異性IgE4抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞specific IgE4 against dust mite antibody
狼瘡抗凝物檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人胸膜瘤細(xì)胞;SMC-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣lupus anticoagulation
粉塵螨特異性IgG4抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣specific IgG4 against dust mite antibody
Ca-Mg-ATPase檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480[SW480;SW-480]形態(tài)特性: 上皮樣Ca-Mg-ATPase
醋甲羥孕檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;T47D[T-47D]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞Medroxyprogesterone 17-acetate
塞卡病檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人骨肉瘤細(xì)胞;U-2OS[U2OS;U2-OS;U-2OS]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞Zika virus
細(xì)胞色素b5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人胃癌細(xì)胞;MGC-803形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Cytochrome 5A
谷氨酰半胱氨連接酶催化亞基檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人食管癌細(xì)胞;TE-10形態(tài)特性: 上皮樣Glutamate--cysteine ligase catalytic subunit
磷化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶結(jié)合蛋白3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人食管癌細(xì)胞;TE-1形態(tài)特性: 上皮樣TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 3
水痘-帶狀皰疹病檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人食管癌細(xì)胞;TE-11形態(tài)特性: 上皮樣Varicella-zoster virus
EB病早期抗原IgA檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人肺扁平上皮癌細(xì)胞;QG-56[QG56]形態(tài)特性: 上皮樣
蓖麻素抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞;HCCLM3形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣;胞質(zhì)內(nèi)有顆粒ricin antibody
β-乙型溶血性鏈球檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人癌細(xì)胞;BT-549形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞β-GBS
SCETIN檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;A172形態(tài)特性: SCETIN
角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;A3形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞Keratinocyte Growth Factor 2
HA tag標(biāo)簽檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱(chēng): 人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣HA tag
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1糖蜜素規(guī)格:1EA詳情介紹
M-腸道菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于水中或其它物質(zhì)中腸球菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(濾膜法或劃線(xiàn)法)
HBI副溶血性弧菌生化鑒定條(SN)規(guī)格:5條/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鑒定,每條包括:無(wú)鹽胨水、3%NaCl胰胨水、7%NaCl胰胨水、10%NaCl胰胨水、3%NaClVP半固體、賴(lài)氨脫羧酶、精氨脫羧酶、氨基脫羧酶對(duì)照、O/F試驗(yàn)(2孔)、蔗糖發(fā)酵管、42℃生長(zhǎng)共12種生化反應(yīng)。(SN標(biāo)準(zhǔn))
色氨肉湯規(guī)格:20支詳情介紹
Letheen瓊脂規(guī)格:250g用途:用于化妝品中微生物檢測(cè)
亞硫鐵多粘菌素B瓊脂規(guī)格:250g用途:用于羽絨羽毛中亞硫鹽還原梭狀芽孢桿菌的計(jì)數(shù)(GB 標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。