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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3
 
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產(chǎn)品名稱:
花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3
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花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3相關(guān)產(chǎn)品:
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  花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3的詳細資料:

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3

貼壁生長

EY-X63808

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細胞名稱  花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雌性花鼠的肺組織。2006年由中國科學(xué)院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P2

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
艾杜糖硫酯酶檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞;SPC-A-1形態(tài)特性: 上皮細胞樣iduronate sulfatase

趨化因子C-C-基元配體3檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;MDA-MB-435S形態(tài)特性: 上皮細胞樣Chemokine C-C-Motif Ligand 3

1,2-棕櫚酰磷酯酰肌醇-4-磷檢測試劑盒細胞名稱: 人導(dǎo)管癌細胞;ZR-75-30形態(tài)特性: 上皮細胞樣Phosphatidylinositol 4-phosphate, 1,2-dipalmitoyl

酪氨蛋白激酶ABL1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠肉瘤細胞;CCRFS-180形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Tyrosine-protein kinase ABL1

止血環(huán)檢測試劑盒細胞名稱: Hela細胞耐藥亞株;HeLa/DDP形態(tài)特性: 上皮細胞樣Tranexamic acid

Laminaribioside糖抗體檢測試劑盒細胞名稱: 血管平滑肌細胞;T/GHA-VSMC形態(tài)特性: 成纖維細胞樣ALCA

Chitobioside糖抗體檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠腹水癌細胞;Walker/LLC-WRC256形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣ACCA

mannobioside糖抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;MCF7形態(tài)特性: 上皮細胞樣AMCA

-α2脂蛋白檢測試劑盒細胞名稱: COC1細胞耐藥亞株;COC1/DDP形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Zinc alpha 2 lipoprotein

葉受體自身抗體檢測試劑盒細胞名稱: 豬腎細胞;PK-15形態(tài)特性: 上皮細胞樣Folate receptor autoantibodies

葉受體檢測試劑盒細胞名稱: VERO細胞衍生株;SVP形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Folate receptor

纖維蛋白單體檢測試劑盒細胞名稱: 人肺癌細胞;A549[A-549]形態(tài)特性: 上皮細胞樣Fibrin monomer

磷二酯酶2檢測試劑盒細胞名稱: 人肝癌細胞;SMMC-7721形態(tài)特性: 上皮細胞樣phosphodiesterase 2

RecQ解旋酶樣蛋白5檢測試劑盒細胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細胞;SW480[SW480;SW-480]形態(tài)特性: 上皮細胞樣RECQL-5

Derlin1蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人胃癌細胞;HS-746T形態(tài)特性: 上皮細胞樣DERL1

血清運鐵蛋白受體檢測試劑盒細胞名稱: 人舌鱗癌細胞;Tca-8113[Tca8113]形態(tài)特性: 上皮細胞樣Serum transferrin receptor

谷氨受體2A檢測試劑盒細胞名稱: 人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293Ad5形態(tài)特性: 上皮樣;多角NR2A
花鼠腎上皮樣細胞;CHPK3小肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g詳情介紹

布氏肉湯規(guī)格:250g用途:用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準)

馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)顆粒規(guī)格:250g拉丁屬名:Potato Dextrose Agar

225ml磷鹽緩沖液均質(zhì)袋規(guī)格:10個/包用途:用于菌落總數(shù),大腸菌群,金葡菌,大腸桿菌樣品制備

PAC斜面培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于弧菌的保存

脫纖維羊血規(guī)格:50ml用途:每100ml HBPM0251中加入7ml脫纖維羊血

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 花鼠腎上皮樣細胞 CHPK3
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