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產品名稱:
果子貍肺成纖維樣細胞;MPCL2
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果子貍肺成纖維樣細胞;MPCL2相關產品:
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  果子貍肺成纖維樣細胞;MPCL2的詳細資料:

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

果子貍肺成纖維樣細胞;MPCL2

貼壁生長

EY-X63786

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細胞名稱  果子貍肺成纖維樣細胞;MPCL2
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雌性果子貍的肺組織。1988年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
脫氧胞苷激酶檢測試劑盒細胞名稱: 人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304[ECV304;ECV304]形態(tài)特性: deoxycytidine kinase

脫氧尿三磷檢測試劑盒細胞名稱: 牛腎細胞;MDBK(NBL-1)形態(tài)特性: 上皮樣deoxyuridinetriphate

微小核糖核檢測試劑盒細胞名稱: 人肝癌細胞;PLC/PRF/5形態(tài)特性: 上皮細胞樣microRNA

尾加壓素Ⅱ相關肽檢測試劑盒細胞名稱: 牛陀螺狀細胞;BT形態(tài)特性: urotensin II-related peptide

胃癌抗原MG7-Ag檢測試劑盒細胞名稱: 恒河猴腎細胞;LLC-MK2形態(tài)特性: MG7-Ag

胃粘液素檢測試劑盒細胞名稱: 人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞;RD形態(tài)特性: 梭型和大的多核細胞Gastric mucin

硒蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-)形態(tài)特性: 膠質、星形細胞樣selenoprotein 1

細胞素相關蛋白A檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠肺細胞;CHL形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Cytotoxin-associated protein

細胞角蛋白19檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠肺細胞;R1610[R1610]形態(tài)特性: 成纖維細胞cytokeratin 19

細胞外基質磷糖蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 二氫葉還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-形態(tài)特性: 上皮細胞matrix extracellular phosphoglycoprotein

細胞纖維連接蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞;CHO形態(tài)特性: 成纖維細胞樣cellular fibronectin

細胞周期素E1檢測試劑盒細胞名稱: 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Cyclin-E1

下游轉錄因子Gli1蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1形態(tài)特性: 上皮細胞GLI-Kruppel family member 1

纖溶酶;纖維蛋白溶酶檢測試劑盒細胞名稱: 倉鼠卵巢細胞;Lec1形態(tài)特性: 上皮細胞plasmin;fibrinolysin

纖溶酶原激活劑檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠肺細胞;V79形態(tài)特性: 成纖維細胞樣plasminogen activator

纖維蛋白原α檢測試劑盒細胞名稱: 人胚腎細胞;293[HEK-293]形態(tài)特性: 上皮細胞Fibrinogen Alpha

纖維蛋白原α鏈前體1亞型檢測試劑盒細胞名稱: 人EB病轉化的B細胞;CGM1形態(tài)特性: 淋巴細胞樣Isoform 1 of Fibrinogen alpha chain precursor
果子貍肺成纖維樣細胞;MPCL2含酶TSA平板規(guī)格:9cm*10/包用途:用于醫(yī)藥環(huán)境監(jiān)測

-心浸萃瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于糞鏈球菌的純化培養(yǎng)

尿素酶規(guī)格:20支用途:用于沙門氏菌和志賀氏菌、霍亂弧菌、致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定

MUGal肉湯規(guī)格:100g用途:用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測計數(GB/T)

明膠規(guī)格:20支詳情介紹

肉湯培養(yǎng)基G規(guī)格:250g用途:用于大腸桿菌、大腸菌群的檢測

產品相關關鍵字: 果子貍肺成纖維樣細胞 MPCL2
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