資源名稱(chēng): pUC118
種屬: pUC118 plasmid
提供形式: 質(zhì)粒干粉
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 質(zhì)粒載體
培養(yǎng)基: 原核抗性:Amp; 克隆菌株:DH5α; 培養(yǎng)條件:37℃。LB培養(yǎng)基,含50μg/mL氨芐鈉。
存儲(chǔ)條件: 4℃避光保存;運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸。
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
pUC118品牌 | pUC118 pla | EY-J963273 |
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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
Eurotium│sp. 中文名稱(chēng):散囊菌屬Eurotium│sp.分離基物:大曲提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:釀酒。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0085生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法;其他 純度:96%
Endomycopsis│fibuliger 中文名稱(chēng):扣囊擬內(nèi)孢霉Endomycopsis│fibuliger提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:96%
Paecilomyces│sp. 中文名稱(chēng):擬青霉屬Paecilomyces│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:防霉實(shí)驗(yàn)菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0015生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:≥96%(HPLC)
Stachybotrys chartarum 中文名稱(chēng):紙葡萄穗霉Stachybotrys chartarum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:28℃,好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥96%(HPLC)
Alicyclobacillus│acidorrestris 中文名稱(chēng):土脂環(huán)芽孢桿菌Alicyclobacillus│acidorrestris分離基物:花園土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類(lèi)學(xué)研究,質(zhì)量控制。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0437生長(zhǎng)條件:45-50℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Bipolaris│sorokiniana 中文名稱(chēng):索氏離蠕孢(小麥根腐病菌)Bipolaris│sorokiniana分離基物:種子提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Aspergillus protuberus 中文名稱(chēng):疣梗曲霉Aspergillus protuberus分離基物:500提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:光學(xué)儀器防霉試驗(yàn)菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:查氏瓊脂(Czapek's Agar):蔗糖 30.0g,NaNO3 3.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,KCl 0.5g,F(xiàn)eSO4·4H2O 0.01g,K2HPO4 1.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH6.0~6.5。生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Neurospora│sitophila 中文名稱(chēng):好食脈孢菌Neurospora│sitophila提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)12(核黃素)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0337生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)
pUC118品牌Columbia agar base 哥倫比亞瓊脂基礎(chǔ)人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞裂解物(S)-(+)-2,3-二氨基 鹽鹽Caspase-8 (pro Mch5) 半胱氨蛋白酶8抗原
Count agar sugar free acc.to FIL-IDF 無(wú)糖計(jì)數(shù)瓊脂人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物(S)-(+)-2,3-二氨基 鹽鹽TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促甲狀腺素受體(抗原)
CT-supplement CT吡劑人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞裂解物3-胍基-L-氨鹽鹽TY3H ( Tyrosine Hydroxylase ) 酪氨羥化酶(抗原)
CZAPEK-DOX agar 查貝克-多克斯瓊脂人腎上皮細(xì)胞裂解物3-胍基-L-氨鹽鹽Tubulin-Alpha 微管蛋白(抗原)
DCLS agar Deoxycholate citrate lactose sucrose agar人腎系膜細(xì)胞裂解物2,5-二甲氧基苯硫酚Cav-1/ETM1 peptide 細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗原
脫氧膽鹽檸檬鹽乳糖蔗糖瓊脂人膀胱平滑肌細(xì)胞裂解物2,5-二甲氧基苯硫酚Beta-catenin/ Beta-cats β-連環(huán)蛋白抗原(β-β鏈接素)
Deoxycholate lactose agar 脫氧膽鹽乳糖瓊脂人尿道上皮細(xì)胞裂解物2,5-二甲氧基苯磺酰p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 磷化β-連環(huán)蛋白抗原
Dermatophyte slective agar(DTM) 皮真菌選擇瓊脂人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞裂解物2,5-二甲氧基苯磺酰Tubulin- Beta 微管蛋白(抗原)