規(guī)格參數(shù)：

資源名稱: 大腸埃希氏菌

種屬: Escherichia coli

提供形式: 定量菌片，西林瓶，2.0~3.0×10e3CFU/瓶

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 研究；分析檢測。研究、質(zhì)量控制用菌，《GB 4789.2-2010菌落總數(shù)測定》、《GB 4789.3-2010腸菌群計數(shù)》、研究；分析檢測?！禛B/T 4789.32-2002大腸菌群的快速檢驗》、《GB 4789.39-2013糞大腸菌群計數(shù)》陽性對照菌株，2015版中國藥典質(zhì)控菌株。

培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。

生長條件: 37℃，好氧

生長特性: G－桿菌，賴氨酸脫羧酶、脫羧酶陽性，雙水解酶陰性，尿素酶、苯脫氨酶陰性，IMViC實驗：+、+、-、-；MUG陽性，纖維二糖、側金盞花醇陰性，葡萄糖銨陽性；不產(chǎn)H2S，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。兼性厭氧，適pH7.4~7.6。

存儲條件: -20℃，避光冷藏

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低溫存法:
①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1～2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3～4個月；②液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備　
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備　
搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備　
種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。
Fusobacrium nucleatum subsp nucleatum 中文名稱：具核梭桿菌聚核亞種Fusobacrium nucleatum subsp nucleatum提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板（成品）生長條件:37℃，厭氧，24-48h 純度：≥99%

Bacillus pasurii 中文名稱：巴氏芽孢桿菌Bacillus pasurii提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CASO +20g/L尿素：蛋白胨 5.0 g，牛肉浸膏 3.0 g ， 尿素 20.0 g ，蒸餾 1.0 L，pH 7.3 。121℃，15min。生長條件:30℃，好氧 純度：98%

Clostridium difficile 中文名稱：艱難梭菌Clostridium difficile提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:硫乙醇鹽培養(yǎng)基:：酪胨15.0g,酵母浸出5.0g，葡萄糖5.0g，硫乙醇鈉0.5g，L-胱氨0.5g，刃天青0.001g，2.5g，pH7.1±0.2。121℃，15min。生長條件:36℃，厭氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Escherichia coli EHEC O157：H7 中文名稱：出血性大腸埃希氏菌 O157：H7Escherichia coli EHEC O157：H7提供形式:凍干管、試管斜面安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 20.0g，蒸餾 1.0L，pH 7.0。121℃，15min滅菌。生長條件:37℃，好氧生長特性G-桿菌，賴氨脫羧酶、鳥氨脫羧酶均陽性，精氨雙解酶陰性，有動力，IMViC實驗：+、+、-、-，尿素酶、丙氨脫氨酶陰性，不產(chǎn)H2S，不發(fā)酵、纖維二糖和側金盞花醇，MUG陰性，發(fā)酵乳糖、。兼性厭氧，適pH7.4~7.6。血清型：O 157 : H 7。存儲條件:4℃，避光冷藏 純度：95%

Haemophilus influenzae 中文名稱：流感嗜血桿菌Haemophilus influenzae分離基物:57歲患者的肺膿瘍提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no應用領域:質(zhì)控菌株；藥敏的試驗；呼吸的研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:巧克力平板（成品）生長條件:37℃，5%CO2 純度：天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in

Kocuria│rhizophila 中文名稱：嗜根考克氏菌Kocuria│rhizophila提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:抗生物質(zhì)殘留檢查。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法 純度：天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in

Escherichia coli O157:H7 中文名稱：大腸埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究；。BBL科瑪嘉質(zhì)控菌株。GB4789.28-2013《食品微生物學檢驗 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》中規(guī)定質(zhì)控菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃，好氧，24h生長特性血清型O157：H7，陰性，Vero 細胸素(志賀素)陰性。存儲條件:2-8℃ 純度：AR,98%

Vibrio harveyi 中文名稱：哈維氏弧菌Vibrio harveyi分離基物:哈維氏弧菌菌株BB120提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no應用領域:哈維氏弧菌 BB－170培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Marine Agar 2216 ：蛋白棟 5.00 g ，酵母 1.00 g ，F(xiàn)e(III) citra 0.10 g ，NaCl 19.45 g， 無MgCl2 5.90 g ，Na2SO4 3.24 g， CaCl2 1.80 g ，KCl 0.55 g， NaHCO3 0.16 g， KBr 0.08 g ，SrCl2 34.00 mg ，H3BO3 22.00 mg， Na-silica 4.00 mg ，NaF 2.40 mg， (NH4)NO3 1.60 mg ，Na2HPO4 8.00 mg， 蒸餾 1000.00 ml， pH 7.6 ± 0.2生長條件:30℃，好氧 純度：99%
大腸埃希氏菌說明書酚紅煌綠瓊脂豬晶狀體上皮細胞肝竇內(nèi)皮細胞phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide  磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗原

水瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基肝星形細胞CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1)  環(huán)腺苷應答元件結合蛋白（抗原）

半固體營養(yǎng)瓊脂平滑肌細胞培養(yǎng)基腎實質(zhì)細胞phospho-CREB-1   磷化環(huán)腺苷應答元件結合蛋白（多肽）

RVS肉湯周邊細胞培養(yǎng)基腎系膜細胞ADRA2 peptide  腎上腺素能受體2抗原

MKTTn肉湯基礎腦膜細胞培養(yǎng)基膀胱上皮細胞CRF (Corticotropin-Releasing Factor)  促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子

M肉湯神經(jīng)前體細胞培養(yǎng)基膀胱平滑肌細胞CT (Calcitonin )  降鈣素（抗原）

煌綠肉湯增菌液基礎神經(jīng)前體細胞分化培養(yǎng)基腎動脈內(nèi)皮細胞CT-R (Calcitonin receptor)  降鈣素受體（抗原）

Rustigian氏尿素培養(yǎng)基基礎少突膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基腎動脈平滑肌細胞Ferritin peptide  鐵蛋白抗原
綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導入曝氣，進行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測；
（6）取液儲存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。