綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型說明書 | Salmonella | EY-J963560 |
資源名稱: 腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型
種屬: Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis
提供形式: 凍干物
安全等級: 2
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件: 36℃,好氧
存儲條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
Salmonella│typhi 27V Reitman strain stre 中文名稱:傷寒沙門氏菌依賴株Salmonella│typhi 27V Reitman strain stre提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:弱株,口服菌苗侯選株 9,12,Vi d -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Salmonella│blegdam 中文名稱:布利丹沙門氏菌Salmonella│blegdam提供形式:凍結(jié)物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:9,12 g,m,q -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:定期移植法 純度:98%
Salmonella│niloese 中文名稱:尼婁斯沙門氏菌Salmonella│niloese提供形式:凍結(jié)物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1,3,19 d z6培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:定期移植法 純度:98%
Salmonella│lexington 中文名稱:列克星敦沙門氏菌Salmonella│lexington提供形式:凍結(jié)物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:3,10,26 z10 1,5培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:定期移植法 純度:90%
Salmonella│milwaukee 中文名稱:密爾沃基沙門氏菌Salmonella│milwaukee提供形式:凍結(jié)物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:43 fg -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:定期移植法 純度:超純級
Salmonella│rutgers 中文名稱:盧特格爾沙門氏菌Salmonella│rutgers提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:3,10 l, z40 1,7培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99%
Salmonella│greenside 中文名稱:格里沙特沙門氏菌Salmonella│greenside提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:50 z e,n,x培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99%
Salmonella│penarth 中文名稱:彭納茲沙門氏菌Salmonella│penarth提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:9,12 z35 z6培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98%
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