產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
弗氏檸檬酸桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Citrobacter freundii | EY00P8821 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
3-氨基-4-三氟甲苯MKTTN肉湯/MKTTN Broth Pirimicarb solution
4-氯-3-甲酰氨酸鐵瓊脂/LIA瓊脂/Lysine Iron Agar Pyrazosulfuron
5-基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯改良MSRV培養(yǎng)基/MSRV Medium Pretilachlor
5-乙氧基吲哚SCCRAM肉湯/SCCRAM Broth Pretilachlor solution
尿刊酸BPL瓊脂/BPL Agar Propoxur solution
4-溴-1,1,2-三氟-1-BPLS瓊脂/BPLS Agar Picloram
MDA 19改良BPLS瓊脂/BPLS Agar Modified Pyrimethanil
1-苯基正癸烷MIO培養(yǎng)基/動力吲哚培養(yǎng)基/MIO Medium Phenmedipham
3-酯XLT4瓊脂/木糖-賴氨酸-硫酸四癸鈉瓊脂/XTL4 Agar/XLT4 Agar Metalaxyl solution
4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮D/E中和肉湯/D-E中和肉湯/戴伊恩格利中和肉湯/D/E Neutralizing Broth Nitrapyrin
3,5-二溴-4-硝基吡唑D/E中和瓊脂/D-E中性瓊脂/戴伊恩格利中和瓊脂/ D/E Neutralizing Agar Profenofos
薄荷酮, mixture of isomersM-肉湯/M肉湯/M-Broth Pyriproxifen
2-溴-3-氟三氟甲苯煌綠黃嘧啶瓊脂/Brilliant Green Agar W/Sulfadiazine Phenthoate solution
(S)-3-氨基四對甲苯磺酸鹽BGS瓊脂/BGS Agar Propanil solution
2-氨基-2,4-二氯甲酯XLD培養(yǎng)基/XLD瓊脂培養(yǎng)基/木糖賴氨酸脫氧膽酸鈉培養(yǎng)基/Xylose Lysine Desoxycholate Medium Phosalone
弗氏檸檬酸桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒肌鈣蛋白C(TNC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)拉莫三 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品3×1ml
連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)拉莫三 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR6次/盒
乙酰輔酶A(A-CoA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)拉莫三 (標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品6次/盒
金屬硫蛋白1(MT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-半乳糖酸 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR3×1ml
α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-半乳糖酸 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98.5%,標(biāo)準(zhǔn)品500 ml
二酰輔酶A脫羧酶(MLYCD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)D-半乳糖酸(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,B-Raf突變抑制劑100ml
抗突觸前膜受體抗體(PsmRAb)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨化三 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品1ml(500X)
肌聯(lián)蛋白(TTN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)骨化三 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品6次/盒