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產品名稱:
小鼠成纖維細胞;φ2
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  小鼠成纖維細胞;φ2的詳細資料:

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產品名稱

小鼠成纖維細胞;φ2

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63248

細胞名稱  小鼠成纖維細胞;φ2
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性:

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%CS

傳代方法: 1:6傳代;2~3天1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
人喉癌上皮細胞;Hep-2形態(tài)特性: 上皮細胞生長特性: 貼壁生長Human Dkk-3 ELISA KIT

人卵巢癌細胞;HO-8910形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Rabbit Serpin F2/alpha-2-antiplasmin ELISA Kit

人食管癌細胞;JAR形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Mouse Fetuin A ELISA KIT

人慢性髓系白血病細胞;K562形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣;圓形生長特性: 懸浮生長Human Dkk-1 ELISA KIT

T淋巴細胞白血病細胞;HuT78形態(tài)特性: 淋巴母細胞生長特性: 懸浮生長Sheep Serpin E1/PAI-1 ELISA Kit

人前列腺癌細胞;LNCaPcloneFGC[LNCaP.FGC]形態(tài)特性: 上皮樣;梭形生長特性: 貼壁生長Human Leptin R ELISA KIT

人結直腸腺癌細胞;LS174T[LS174T]形態(tài)特性: 上皮細胞生長特性: 貼壁生長Bovine MMP-9 ELISA Kit

人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移);KP-N-NS形態(tài)特性: 其他生長特性: 貼壁生長Human FLRG ELISA KIT

人肺腺癌細胞;Lu-165形態(tài)特性: 上皮樣細胞生長特性: 貼壁生長Human β-NGF ELISA KIT

人癌細胞;MDA-MB-453形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 半貼壁生長Human u-Plasminogen Activator ELISA KIT

人肺腺癌細胞;LTEP-a-2形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長 Mouse IGFBP-5 ELISA KIT

人癌細胞;MDA-MB-435S形態(tài)特性: 紡錘形生長特性: 貼壁生長Feline CCL4/MIP-1b ELISA Kit

人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4形態(tài)特性: 淋巴母細胞生長特性: 懸浮生長Canine (dog) BMP2 ELISA Kit

人小細胞肺癌細胞;NCI-H446形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁/懸浮生長,混合Canine (dog) CCL4/MIP-1 beta ELISA Kit

人大細胞肺癌細胞;NCI-H460[H460]形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human REG1B ELISA KIT

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小鼠成纖維細胞;φ2小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒APCRELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

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小鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒APFELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

小鼠抗(AT)ELISA試劑盒Apl/APAELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

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產品相關關鍵字: 小鼠成纖維細胞 φ2
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